尼罗罗非鱼钙结合蛋白S100P基因的克隆及功能分析

来源：大连海洋大学学报杂志2024年第4期北京时间：

作者：李一, 吴雪莹, 钟勇, 庾娜, 黄瑜, 王蓓, 简纪常, 蔡佳

单位：1.广东海洋大学 水产学院，广东 湛江 524088；2.广东省水产动物病害防控与健康养殖重点实验室，广东 湛江 524088

摘要：为探究尼罗罗非鱼(Oreochromisniloticus)钙结合蛋白S100P基因(OnS100P)的功能，根据从罗非鱼头肾转录组获得的OnS100P序列设计特异性引物，克隆得到OnS100P，并对其推导的氨基酸序列进行生物信息学分析，利用荧光定量PCR技术，研究其在不同组织中的定位和表达水平及Poly (I∶C)刺激后该基因在各个组织中的表达模式，并表达与制备了重组蛋白，用于孵育尼罗罗非鱼头、肾、淋巴细胞后研究其对炎症因子转录的调控作用。结果表明：OnS100P基因CDS长度为288 bp，可编码96个氨基酸，含有S100蛋白家族的保守结构域；系统进化树结果分析表明，尼罗罗非鱼同斑马丽鱼(Maylandiazebra)的S100P具有较高的同源性；组织分布分析显示，OnS100P在尼罗罗非鱼的不同组织中均有表达，其中以肌肉和鳃的表达量最高；经Poly (I∶C)刺激后，罗非鱼肠道、头肾和脑组织中OnS100P表达水平显著升高且刺激24 h后达到高峰；制备的OnS100P重组蛋白 (rOnS100P)可诱导肾淋巴细胞MIF、IL8、TNF-β及IL1-β的表达。研究表明，OnS100P氨基酸序列具有S100保守结构域，与其他S100蛋白家族成员类似，可通过调节淋巴细胞炎症因子的表达影响鱼类的免疫应答。

关键词：尼罗罗非鱼,钙结合蛋白S100P,重组蛋白,Poly(I∶C),淋巴细胞

基金资助：国家自然科学基金(32002426，32073006)；湛江市科技计划项目(2022A01012，2022A01006)；农业农村部外来入侵水生生物防控重点实验室2023年度开放课题(20230302)