《大连海洋大学学报杂志》发表论文赏析
作者:张益民, 罗婷婷, 詹圆圆, 孙玉华
单位:1.大连海洋大学 水产与生命学院,辽宁 大连 116023;2.中国科学院水生生物研究所,湖北 武汉 430072
摘要:为优化黄鳝(Monopterusalbus)生殖干细胞(germline stem cells,GSCs)分离纯化方法及生殖干细胞同种移植程序,采用性腺体指数比较及组织学观察法对不同年龄黄鳝性腺进行分析,使用Percoll密度梯度离心法分离性腺细胞,通过流式细胞术、碱性磷酸酶染色、干性基因差异表达分析等方法对黄鳝生殖干细胞进行鉴定,并进行生殖干细胞移植。结果表明:黄鳝生殖干细胞富集层为40% Percoll浓度层,占比达72.52%;自体移植最佳移植供体为1龄雌鱼,最佳移植受体为4~5龄雄鱼;白消安-高温联合处理法基本可以耗尽受体鱼内源性生殖细胞,之后移植的生殖干细胞可以在受体鱼体内定植并增殖,成功率达75%;Percoll密度梯度离心法可以在较短时间内分离纯化黄鳝生殖干细胞,获取的细胞可用于生殖干细胞移植,同种异体移植成功率较高,具有优秀的移植潜力。本研究可为黄鳝生殖干细胞同种移植体系的建立提供科学参考。
关键词:黄鳝,Percoll密度梯度离心法,生殖干细胞,生殖干细胞移植
基金资助:国家重点研发计划重点专项(2022YFD2400101)