尼罗罗非鱼LCP1基因的克隆、表达及功能分析

来源：大连海洋大学学报杂志2025年第5期北京时间：

作者：李伟富, 袁嘉翊, 张湘东, 汪志文, 夏洪丽, 鲁义善

单位：1.广东海洋大学 水产学院，广东省水产动物病害防控与健康养殖重实验室，广东 湛江 524088；2.广东海洋大学 深圳研究院，广东省水生动物健康评估工程技术研究中心，深圳市海水经济动物种苗健康评价公共技术服务平台，广东 深圳 518120

摘要：为研究尼罗罗非鱼(Oreochromisniloticus)LCP1基因的分子特征及其在抵抗无乳链球菌免疫应答中的潜在功能，从尼罗罗非鱼中克隆出了LCP1基因，命名为OnLCP1，并对该基因进行生物信息学分析和亚细胞定位分析；运用荧光定量PCR技术分析了经灭活无乳链球菌免疫刺激后OnLCP1在各组织中mRNA的表达情况；采用双荧光素酶报告系统检测了过表达LCP1对NF-κB、STAT1、ISRE、IFN-1和IFN-3信号通路活性的影响。结果显示，OnLCP1包含1 857个碱基对，可编码一个618氨基酸的蛋白质，OnLCP1蛋白被鉴定含有EF臂结构域(钙结合结构域)和两个串联的肌动蛋白结合结构域(ABD)，每个肌动蛋白结合结构域均包含两个钙调蛋白同源(CH)结构域；OnLCP1是一个无跨膜的细胞外蛋白，与人类LCP1蛋白的三维结构高度相似，表明其功能可能是保守的；荧光定量PCR分析显示，OnLCP1基因在健康尼罗罗非鱼的不同组织中均有表达，尤其在脾脏中表达量最高；研究发现，经灭活无乳链球菌免疫后，OnLCP1基因在免疫器官中的表达量显著增加，表明其可能参与了对病原菌的免疫应答；亚细胞定位显示，OnLCP1在HEK-293T细胞的细胞质中表达；双荧光素酶报告系统显示，OnLCP1显著提高了NF-κB信号通路的活性(P<0.05)，表明该分子可能通过NF-κB通路介导罗非鱼抵御无乳链球菌感染。本研究结果为进一步研究LCP1基因在鱼类先天免疫中的功能提供了科学参考。

关键词：尼罗罗非鱼,LCP1基因,无乳链球菌,mRNA表达分析

基金资助：广东省基础与应用基础研究基金(2021A1515110214)